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绵羊毛囊培养方法的建立及雌二醇对毛囊Bcl-2、Bax表达的影响绵羊毛囊培养方法的建立及雌二醇对毛囊Bcl-2、Bax表达的影响

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资源描述:
分类号 S852.1 学校代码 10129 I C S 11.220 学 号 05101019 内蒙古农业大学博士学会论文绵羊毛囊培养方法的建立及雌二醇对毛囊Bcl-2、Bax表达的影响Establish on methods of Culturing Sheep Hair Follicles and Effect on the Expression of Bcl-2 and Bax by Estradiol in Hair Follicles申 请 人:汪长寿学科门类:农 学学科专业:基础兽医学研究方向:动物组织胚胎与发育生物学指导教师:曹贵方 教授论文提交日期:二〇〇八年四月摘 要毛囊是皮肤重要而复杂的附属器官,从内向外依次由毛根、内根鞘和外根鞘组成。本实验通过对绵羊毛囊的显微分离、培养,倒置显微镜观察培养毛囊早、中、后期的组织形态变化规律。目镜测微尺测量毛囊长度,同时做离体培养毛囊组织学检测,探讨体外培养毛囊的生长和周期性再生的变化特点和影响因素,从而建立了绵羊毛囊的理想的体外培养体系,为进一步研究奠定了基础;在体外培养体系中加入17-β-雌二醇,并运 - C 、组织化学 、实时 定量研究检测了雌 素对培养毛囊形态的影响 分 生 学 培养毛囊中 基因-2、 的 素 的 系。 ¡¢1. 生长期毛囊的£定 ⁄运 显微¥ƒ 、§currency1 、'“化 « ,成‹›分离fi了fl –†生长期毛囊。‡形态学、组织· £定,毛¶•显‚为„”»…, ‰ ¿为 `•的´· 形ˆ˜ ¯2-21˘2-2˙¨,毛囊内根鞘、外根鞘、毛根„” ˚,¸ 培养毛囊为生长期˝˛ˇ—的毛囊, 为研究绵羊皮肤毛囊 -2、 素 系的研究 毛囊。毛¶•显‚为 –定形ˆ,内根鞘、外根鞘、毛 毛¶• ˚,¸为 生长期毛囊。本实验 的毛囊 为生长期毛囊。2. 体外培养绵羊毛囊体系的建立 生长期˝˛ˇ—的毛囊,在 同 Æ、 同培养 中对ª培养并 fi ¢ ˙1 、 和 度、5Ł CØ2Œ度的体外培养Æ¡,在º – „培养 中加入æ- ı2 、łøœø 2 、ß 素10 、 铁蛋白10 、氢化 的松10n 、亚硒酸钠10n 、青霉素100u 、链霉素100 的体系是最佳选择。˙. 该体系中培养毛囊的特征¢成活率 87.25Ł,前1˘10天增长最快,前10天平 增长长度为0.˙6 d;一般15˘20天都 会贴壁,前15天毛囊的形态没有明显的改变,生长后期,毛¶•‰ 成一团,¿变 越来越小,整个毛囊变 。培养22天后毛囊fi现贴壁,角朊 从外根鞘中迁fi,毛囊生长减慢,从毛球至毛 逐渐 外根鞘向外 散, 现明显的退化ˆ态,但毛囊仍存活,总的趋势是体外培养毛囊随时 后移形态 构由„”逐渐变为 。4. 雌 素˜17-β-雌二醇¨对毛囊生长的影响 在已建立 的体系中游离毛囊培养1天后筛选fi生长较 的毛囊˜增长速度≥0.1 d¨,再更换添加有 同Œ度雌 素的新的– „培养 ,运 倒置显微镜观察、目镜测微尺测量培养毛囊增长长度、制 培养毛囊早、中、后期的组织· ,对ª观察其组织形态变化规律,记录 并照 、数据统计分析。 显‚¢雌 素对毛囊的生长有抑制 ,但有个别Œ度˜ ¢10-8 ¨长势 于阴性对照,原因是该Œ度接近体内ˇ—生长Œ度,此时体外培养毛囊生长环境接近体内稳定ˆ态, 长势 。10-10˘10-
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